產(chǎn)品介紹

源葉EdU-488細(xì)胞增殖檢測試劑盒(Meilun EdU Cell Proliferation Kit with Alexa Fluor 488)，是一種利用核苷滲入法對細(xì)胞增殖情況進(jìn)行快速、簡單、高靈敏檢測的試劑盒。其原理為：試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物，EdU可以在在細(xì)胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針Alexa Fluor 488 Azide)通過Cu+的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Click reaction) (圖1)。通過點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會被綠色熒光標(biāo)記，然后通過檢測熒光信號實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖的檢測。細(xì)胞增殖檢測是評估細(xì)胞活性、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果等的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。細(xì)胞增殖檢測的方法按照原理通?？梢苑譃槲孱悾耗p傷檢測、代謝活性檢測、ATP水平測定、DNA合成檢測和細(xì)胞熒光標(biāo)記檢測法。目前公認(rèn)的最精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成，即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法，但BrdU法的缺點(diǎn)是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合，導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞，影響了其他染料的結(jié)合染色，導(dǎo)致染色彌散，準(zhǔn)確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優(yōu)點(diǎn)：

安全-----不使用[3H]thymidine，無放射性污染。

簡單-----基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法，簡單高效，僅需三步：EdU孵育；細(xì)胞固定；熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。

快速-----無需過夜，省卻抗原抗體反應(yīng)。整個檢測過程只需 2.5 小時，大大縮短實(shí)驗(yàn)周期。

準(zhǔn)確-----標(biāo)記率高且無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來的樣品損傷，確保細(xì)胞核邊緣清晰完。

靈敏-----無需抗體，檢測染料僅為BrdU抗體的1/500，更容易擴(kuò)散，即使單個增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測。

兼容-----對樣品幾乎無損傷，允許與多種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記，能夠同時檢測細(xì)胞其他性狀特征。